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品牌：Thermofisher Scientific/賽默飛世爾
產品名稱：Staining Buffer Set轉錄因子染色緩沖液集
型號：00-5523-00
Foxp3 轉錄因子流式固定破膜緩沖液經過配方設計和優化，可使用抗體對轉錄因子和核蛋白（例如 Foxp3 和 Ki-67）以及細胞因子和趨化因子進行染色。為了您的便利，我們已經提供了這些方案，用于在流式細胞儀上制備細胞內抗原檢測用樣品。
1. 準備工作液：
1）工作液D：取1份PF00011-A（Foxp3 / 轉錄因子固定/破膜濃縮液 4X）和3份PF00011-B（Foxp3 / 轉錄因子固定/破膜稀釋液 1X）進行混合，混勻后備用。
2）工作液F：取1份PF00011-C（流式細胞術破膜緩沖液 10X）和9份超純水混勻后，制備成流式細胞術破膜緩沖液（1X）備用。
2. 按照Proteintech的細胞表面流式細胞術的實驗步驟中說明進行細胞表面染色。（如不需要進行細胞表面染色，略過此步驟。）
3. （表面染色后，洗滌，棄上清）每1 x 10^6/cells的EP管中加入1 mL工作液D，緩慢吹打以確保細胞重懸。在室溫下避光孵育45分鐘。
4. 在室溫下以 400-600g 離心5分鐘，棄上清，向EP管中加入2 mL工作液F，緩慢吹打以確保細胞重懸，400-600g 離心5分鐘，棄上清。
5. 將細胞沉淀重懸于 100 uL 工作液F中，靜置10-15min。
6. 使用抗體推薦用量 如5 uL/Test（或使用工作液F對流式抗體進行預稀釋），避光孵育抗體-細胞混合物30-45min，用于檢測細胞內抗原。
7. 孵育完畢后，每管中加入2 mL工作液F。
8. 在室溫下以400-600g離心試管 5 分鐘，然后棄上清。
9. 每管中加入2 mL工作液F。
10. 在室溫下以400-600g離心試管 5 分鐘，然后棄上清。
11. 將細胞沉淀重懸于加入0.2 mL工作液F中。
12. 在流式細胞儀上采集樣品。
品牌：Thermofisher Scientific/賽默飛世爾
產品名稱：Staining Buffer Set轉錄因子染色緩沖液集
型號：00-5523-00
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